Seminario de Evaluación M. en C. Landy Estephania Zambrano Argüello
Aula de Seminarios Biología Celular
Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC), produce colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico en humanos. Los factores de virulencia clave durante la patogénesis de EHEC son la toxina de Shiga y el sistema de secreción tipo III (T3SS). Sin embargo, EHEC alberga cinco diferentes sistemas de secreción (SS): T1SS, T2SS, T3SS, T5SS y T6SS. El T3SS es el SS más estudiado con alrededor de 39 sustratos secretados, mientras que los otros SS han sido poco estudiados. Hasta ahora, se desconoce cómo estos SS participan colectivamente en la interacción EHEC-células epiteliales durante el proceso infeccioso. En este trabajo, primero optimizamos la secreción de proteínas por cuatro de los SS de EHEC, excepto el T6SS que es inactivo in vitro; y estudiamos su comportamiento en ausencia y presencia de células epiteliales. Aquí demostramos que la secreción de factores de virulencia a través de los SS de EHEC siguió una jerarquía de secreción cuando las bacterias se encuentran con células epiteliales. Cabe destacar, que mediante un extenso análisis proteómico identificamos que las mutantes en cualquiera de los SS afectan globalmente la secreción de sustratos. Además, nuestro análisis del secretoma en presencia y ausencia de células reveló que i) EHEC incrementa la secreción de sustratos/ factores de virulencia en presencia de células, ii) la falta de un SS modifica la secreción de sustratos en otros SS, iii) la presencia de células epiteliales puede, en algunos casos, atenuar el efecto causado por la mutación en los SS; y iv) el análisis bioinformático de las proteínas presentes en los secretomas nos permitió identificar posibles nuevos sustratos para los diferentes SS de EHEC. El análisis de validación por Western blot mostró la interdependencia entre SS para la secreción de sustratos, así como un aumento en la abundancia de sustratos por la presencia de células epiteliales. Nuestros datos sugieren una interacción compleja entre los diferentes SS cuando interactúan con células epiteliales, lo que impacta la interacción célula epitelial-bacteria durante el proceso infeccioso y, en consecuencia, la patogénesis de EHEC.