Seminario de Avance M. en C. Arturo Ortiz Fernández

Aula de Seminarios Biología Celular

Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) se ha consolidado como un agente etiológico emergente, asociado tanto a diarrea aguda como a cuadros persistentes que afectan de manera especial a niños, adultos inmunocomprometidos y viajeros. Dentro de los factores de virulencia de EAEC la proteasa Pic (Protease Involved in Colonization) se ha relacionado con diversos procesos patogénicos, como la degradación de proteínas del complemento, la alteración de la mucosa intestinal y recientemente se demostró la actividad dual de secretagogo de mucina, así como de mucinasa. La secreción rápida de mucinas está relacionada con la vía PLC/DAG-IP3/Calcio, pero hasta ahora se desconoce el receptor al que se une Pic para provocar dicha secreción. Previamente se demostró que los receptores PAR2 y P2Y2 tienen una mayor afinidad por los dominios 1 y 2 de Pic, respectivamente, haciendo docking molecular. Debido a esto, decidimos hacer mutantes en estos dominios y observamos que Pic con la deleción del dominio 1 (PicΔd1) pierde la capacidad de degradar la mucina secretada, mientras que la deleción del dominio 2 (PicΔd2) mantuvo la actividad de serin proteasa. Al mismo tiempo determinamos que PicΔd1 no activa la secreción de mucina en células caliciformes, mientras que PicΔd2 si causó secreción de mucinas, aún cuando se inhibía la función del motivo de serin proteasa usando PMSF. De manera relevante encontramos que Pic no se une a la membrana de células epiteliales, pero si a la membrana de células caliciformes. Adicionalmente, PicΔd1 no se adhiere a las células caliciformes mientras que pudimos detectar a PicΔd2 adherido en la membrana de esas células. Así, el dominio 1 es un factor determinante para la activación de su receptor y la secreción rápida de mucinas por células caliciformes, además de su ya conocido papel en la degradación de las mucinas. Una vez identificada el dominio de union en Pic, ahora nos encontramos identificando al receptor en las células caliciformes que reconoce el dominio 1 de Pic. La identificación del receptor que es activado por Pic permitirá una comprensión más profunda de la fisiopatología de EAEC y abriría nuevas oportunidades terapéuticas enfocadas a interrumpir esta interacción específica.