Diseño e Implementación de sistema CRISPR-Cas9 in vitro

Imparte: M. en C. Jorge Luis Cuen Andrade
Responsable: Dr. Edgar Morales Ríos
Tiempo total del curso: 40 horas
Horario: 10:00 a 18:00 hrs

Departamento de Bioquímica, CINVESTAV-Zacatenco

• Historia y descubrimiento del sistema CRISPR-Cas9
• Origen y evolución de los sistemas CRISPR-Cas
• Elementos del locus CRISPR
• Clasificación de los sistemas CRISPR

• Estructura de la proteína Cas9
• Ortólogos de uso común de la proteína Cas9
• Definición y elementos del RNA guía (gRNA)
• Sitios PAM
• Formación del complejo Cas9-RNA (RNP)
• Reconocimiento y unión al sitio PAM
• Mecanismo de unión al D]NA objetivo

• Proceso de corte de DNA
• Empleo del sistema CRISPR-Cas9 como tijeras moleculares
• Mecanismos de reparación de rupturas en las cadenas de DNA
• nCas9 y Split-Cas9
• CRISPRa y CRISPRi
• ABEs y CBEs
• Identificación de interacciones DNA:proteína

• Determinación y obtención de secuencias de DNA objetivo
• Diseño de sgRNA y plantillas de edición (HDRt)
• Purificación de la proteína Cas9 mediante cromatografía de afinidad
• Métodos de entrega del sistema CRISPR-Cas9

• Aumento en la fidelidad
• Reducción de tamaño
• Modificación del sitio de reconocimiento del PAM
• Prime Editing
• Fusiones

• Cambio en el fenotipo
• Selección mediante el uso de endonucleasas
• HRM y Sanger
• Detección de cortes off-target

• Sistemas CRISPR-Cas alternativos (Cas12 y Cas13)
• Diferencias funcionales entre los sistemas Cas9, Cas12 y Cas13
• Ventajas y limitaciones de cada sistema
• Análisis comparativo de sistemas CRISPR-Cas

• Terapia génica y tratamiento de enfermedades genéticas
• Mejoramiento genético de cultivos y ganadería
• Tratamiento de infecciones virales y bacterianas
• Diagnóstico molecular rápido y preciso
• Investigación y desarrollo de modelos animales y celulares
• Regulación epigenética
• Control de especies invasoras y conservación ambiental
• Ingeniería de microorganismos para producción biotecnológica
• Medicina regenerativa y clonación
• Sistema de almacenamiento de información

• Desafíos técnicos
• Efectos off-target
• Toxicidad celular
• Respuesta inmune del organismo
• Sistemas anti-CRISPR

• Seguridad y eficacia del sistema CRISPR-Cas9
• Impulsos genéticos y modificaciones en el genoma humano
• Aplicaciones controversiales y regulación ética
• Perspectivas futuras y nuevas herramientas CRISPR
• Debate y análisis de casos éticos relacionados con el sistema CRISPR-Cas9

• Amplificación y purificación de DNA objetivo (4h)
• Diseño de sgRNA para edición mediante CRISPR-Cas9 (4h)
• Generación y purificación de templado de DNA para IVT (4h)
• Síntesis de sgRNA mediante IVT (4h)
• Ensayo de actividad endonucleasa del complejo Cas9-RNA (4h)

ACADÉMICOS: $7,000.00 MXN

INDUSTRIA: $10,000.00 MXN

El curso tiene un cupo limitado a 20 personas, por lo que la inscripción permanecerá abierta hasta agotar los lugares disponibles. El pago del curso puede realizarse en un solo evento o de forma diferida. En este último caso, el primer pago deberá cubrir el 50% del costo total del curso (por ejemplo, $3,500.00 MXN para académicos). El monto restante deberá pagarse a más tardar el miércoles 30 de abril de 2025. En caso de no cumplir con esta fecha, la plaza dejará de reservarse y se ofrecerá a los solicitantes en lista de espera.

Si requiere factura, es necesario enviar al correo electrónico jorge.cuen@yupisnoopydroopycinvestav.mx los siguientes documentos:

1. Razón social de la empresa
2. Constancia de Situación Fiscal
3. Método de pago (tarjeta de crédito, tarjeta de débito, cheque, entre otros)
4. Forma de pago (pago único o pago diferido)

La cuenta donde se recibirá el pago es la siguiente:

• Banco: Banco Mercantil del Norte, S.A. (BANORTE)
• Nombre de la cuenta: R11L4J601410052024
• Número de cuenta: 7500023874
• CLABE interbancaria: 072180075000238742